English
!

Архив публикаций

Тезисы

XXI-ая конференция

Роль кальциевой регуляции активности фосфолипазы – с в активации тромбоцита

Балабин Ф.А., Свешникова А.Н.

Россия, 119992, ГСП-2, г. Москва, Ленинские горы, МГУ имени М.В.Ломоносова, Дом 1, строение 2, Физический Факультет

1  стр. (принято к публикации)

Фосфолипаза-C(PLC) – мембранный фермент, гидролизующий фосфатидилинозитол(4,5)-бифосфат (PIP2) - фосфолипид, находящемся во внутреннем слое плазматической мембраны тромбоцита – на два основных вторичных мессенджера (инозитолтрифосфата (IP3) и диацилглицерола (DAG)), участвующих в сигнальных каскадах активации тромбоцита, индуцированных рядом рецепторов (P2Y1, PAR1, PAR4, TR и прочими). На основе работы Дж. Бланка и соавторов [1], активность PLC регулируется концентрацией ионов кальция по кинетике Хилла. Однако, обычно эта связь не учитывается при исследовании кальциевой сигнализации клеток.

Цель работы - исследовать влияние положительной обратной связи через фосфолипазу-С на динамику концентрации ионов кальция в цитоплазме тромбоцита.

Исследования динамики концентрации кальция проводилось посредством компьютерного моделирования. За основу была взята модель активации тромбоцита через PAR1 рецептор из работы [2]. Модель представляет собой систему обыкновенных дифференциальных уравнений, интегрируемых методом LSODA в среде COPASI.

В модели активации тромбоцита [2] была сделана замена уравнения, описывающего кинетику IP3, с закона действующих масс на уравнение Хилла. Благодаря этому, появляется новый инструментарий для анализа свойств PLC: можно варьировать константу полуактивации фермента и хилловский коэффициент. Метод моделирования заключается в варьировании одного из вышеназванных параметров при фиксированном другом. При этом критерием достоверности результатов считалось сохранение колебаний концентрации цитоплазматического кальция в тромбоците, которые достоверно наблюдались в нескольких экспериментальных работах. В качестве выходных результатов были сняты три группы графиков. В первой фиксировалась константа полуактивации на уровне 100 нМ и варьировался хилловский коэффициент в пределах от 0.1 до 2. Во второй и третьих группах варьировалась константа полуактивации в пределах 50 – 325 нМ.

В результате было показано, что физиологичные результаты достигаются при отрицательной и нейтральной кооперативности (коэффициент Хилла 0.5 или 1), при этом положительная обратная связь дает увеличение числа и продолжительности колебаний концентрации кальция.

1. J.L. Blank, A.H. Ross, J.H. Exton. Purification and characterization of two G-proteins that activate the beta 1 isozyme of phosphoinositide-specific phospholipase C. Identification as members of the Gq class// J Biol Chem, 1991, 266, 18206-18216

2. A. Golomysova and M.A. Panteleev. Systems biology of platelet activation: a stepped hierarchy of responses arises from the calcium interplay between cytosol, dense tubular system and mitochondria //J Thromb Haemost, 2013, 11 (Suppl. 2), 776-777



© 2004 Дизайн Лицея Информационных технологий №1533