|
Conference publicationsAbstractsXXII conferenceOrganization of intracellular structures of N. crassa during the tip growthMoscow State Lomonosov University, Belozersky Institute of physico-chemical biology. Russia, 119992, Moscow, Vorobiev Hills, MSU, phone: (495) 9395506, fax: (495) 9393181, e-mail: potapova@genebee.msu.ru 1 pp. (accepted)Гифы N. crassa активно осваивают поверхность субстрата путем верхушечного роста, удлиняясь на концах ветвей с высокой скоростью, а также периодически образуя новые ветви и поперечные хитиновые перегородки (септы). Внутриклеточное пространство гифы сложно структурировано, особенно в области растущей верхушки [1]. Ранее мы показали, что митохондрии N. crassa формируют скопления нитевидных структур на передних концах (длиной примерно 30 мкм) целых гиф и изолированных верхушечных фрагментов, как в полноценной питательной среде, так и при дефиците в среде источника углерода. Эти скопления продвигаются вперед вместе с удлинением гифы и при раздвоении верхушки распределяются между новыми верхушками, а при образовании новых боковых ветвей формируются заново подобно тому, как это известно для микротрубочек. На основании совместного анализа структурных данных и представлений об электрической гетерогенности гифальной верхушки мы предположили возможность управления организацией внутриклеточных структур со стороны электрического поля, которое создается и поддерживается неоднородным распределением на верхушке гифы основных генераторов мембранного потенциала N. crassa - протонных АТФаз плазматических мембран [2]. В данной работе мы исследовали организацию септальных перегородок и ядер при верхушечном росте вегетативных гиф N. crassa, в том числе в среде с дефицитом глюкозы и (или) после изоляции верхушек от мицелия, с помощью флуоресцентных маркеров Calcofluor White и DAPI на живых и фиксированных препаратах. Анализ изображений проводили с помощью программы Axio Vision LE. Мы наблюдали, что у изолированных фрагментов в среде с дефицитом глюкозы существенно увеличивается расстояние между верхушкой и первым боковым ветвлением. В то же время оказалось, что расстояние первой септальной перегородки от верхушки и межсептальные расстояния на переднем конце гифы длиной около 700 мкм не зависят ни от содержания углерода в среде, ни от связи верхушки с мицелием. Полученные данные опровергают общепринятую гипотезу об инициации бокового ветвления септированием. При исследовании распределения ядер в растущих верхушках мы наблюдали их отсутствие нап переднем участке длиной около 10 мкм и группирование по 10-30 штук на участках длиной 50-100 мкм с расстяниями между такими группами до 200 мкм. Согласование поведения септальных перегородок и ядер с механизмом удлинения гифы пока остается не понятным.
Публикации по теме: 1. Потапова Т.В. (2014) Структурная и функциональная организация растущих верхушек Neurospora crassa // Биохимия, т.78, вып.7, с.753-769. 2. Potapova T.V. (2012) Cell-to-cell communication in the tip growth of mycelial fungi. In: Bicommunication of Fungi. Berlin-Heidelberg, Springer-Verlag, pp. 103-114.
|
